实验原理是通过脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染，然后将该血清放置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在通电后，脂蛋白将向正极移动，并分为多个区域带。

### 试剂与器材

1. **巴比缓冲液** (pH 8.6，离子强度 0.075)：用于电极缓冲液，由巴比/妥钠154g，巴比/妥276g，EDTA酸0.292g配制，溶解后加水至1000ml。

2. **三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液** (pH 8.6)：凝胶缓冲液，由三甲基氨/基甲/烷12.12g，EDTA酸0.29g，NaCl15.85g配制，溶解后加水至1000ml。

3. **琼脂糖凝胶**：045g琼脂糖，50ml三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液，50ml水加热至沸腾，待琼脂糖溶解后立刻停止加热。

4. **挖槽工具**：制作切口刀，刀片长度15mm，用有机玻璃或木片夹住，并用螺丝固定；挖槽小匙，由直径15mm的铜丝制成，锤成扁平状，打磨光滑。

5. **电泳槽和电泳仪**：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所需设备相同。

### 操作步骤

1. **预染血清**：在小试管中，将0.2ml血清与0.2ml苏丹黑染色液混合，置于37℃水浴中染色30分钟，然后以2000转/分钟离心约5分钟。

2. **制备琼脂糖凝胶板**：将已配制的0.45%琼脂糖凝胶在沸水浴中加热融化，然后用吸管吸取凝胶溶液浇注于载玻片，每片25ml，静置约半小时待凝固。

3. **点加血清**：在已凝固的琼脂糖凝胶板一端约2cm处，使用切口刀片垂直切入胶体，然后用铜丝小匙取出长方形小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽中的水分，再用血色素吸管吸取约15μl预染血清，注入小槽内。

4. **电泳**：将添加血清的凝胶板平行放入电泳槽，样品应位于阴极端。用巴比/妥缓冲液浸透的三层纱布轻轻贴在凝胶板的两端，另一端浸于电泳槽内的巴比/妥缓冲液。接通电源，电压设置为120~130V，电流为每片3~4mA。电泳约15至55分钟，即可观察到分离的色带。

### 注意事项

1. 电泳样品必须为新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶可平行挖两条小槽，方便添加两个样品。

3. 使用与小槽形状相同的有机玻璃片，在琼脂糖凝固前固定于合适位置，凝固后取出有机玻璃片将留下小槽，可直接加样。

4. 若需保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）浸泡于清水中脱盐2小时，随后放入约80℃的烘箱中烘干。

### 结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白可呈现三条区带：从负极到正极依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（略深于前β），原点处不应有乳糜微粒。

2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深，并结合血清甘油三酯显著升高和胆固醇正常或略高，可定为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 若β-脂蛋白区带明显深染，结合血清总胆固醇显著增高、甘油三酯正常者，则为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高，前β略溶者则为Ⅱb型。

4. 若β-和前β-两区带未分离，称为“宽β区带”，结合血清甘油三酯和胆固醇均增高，可定为Ⅲ型。

5. 原点出现乳糜微粒，且β和前β均正常或减低，结合血清甘油三酯显著升高，可定为Ⅰ型。

918博天娱乐官网所售产品仅供科研实验使用，不得用于临床！