在生物医学研究中，GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）的操作规程如下：

1. 细胞培养

首先，在96孔板中加入100μL细胞悬液。对于细胞增殖实验，每孔通常需添加2000个细胞；而细胞毒性实验则需添加5000至10000个细胞。具体的细胞数量应根据细胞的大小及增殖速度进行调整。然后，将96孔板置于37℃、5% CO₂的细胞培养箱中培养24小时。

2. 添加化合物

接下来，向每孔中加入适量的0～10μL受试化合物。

3. 孵育

将96孔板置于37℃、5% CO₂、100%湿度的细胞培养箱中，孵育适当时间。

4. 准备MTT溶液

使用稀释液将5×MTT稀释至1×MTT溶液。

5. MTT检测

向每孔中添加50μL的1×MTT溶液，并在37℃下孵育4小时，以促使MTT还原形成甲臜。

6. 溶解甲臜

吸出各孔的上清液，并向每孔添加150μL DMSO以溶解甲臜，随后在平板摇床上摇匀。

7. 光密度检测

使用酶标仪在570nm波长处检测每孔的光密度（如没有570nm滤光片，可使用560-600nm的滤光片进行检测）。

8. 结果分析

分析结果时，可通过以下步骤进行：

• 细胞存活率：将各测试孔的OD值减去背景OD值（培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔的OD值（培养基加不同浓度的受试药物加MTT，无细胞），然后对各重复孔的OD值进行平均处理，并计算标准差（±SD）。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值，计算公式为：细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD）×100。
• 药物浓度计算：求出T/C为50%时的药物浓度（IC₅₀）以及T/C为10%时的药物浓度（IC₉₀）。

通过上述步骤，您可以有效评估GPCR19激动剂的生物活性。在生物研究领域，选择信誉良好的品牌如918博天娱乐官网的产品，不仅能确保实验的成功率，更能提高您研究的整体水平。